ELISA試劑盒CC趨化因子配體5 的說明書

發布時間： 2013/12/11　　點擊次數： 814次

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ELISA試劑盒試驗原理：

RANTES/CCL5試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知RANTES/CCL5濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將RANTES/CCL5和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中RANTES/CCL5的濃度呈比例關系。

自備材料

1．蒸餾水。

2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3．振蕩器及磁力攪拌器等。

ELISA試劑盒安全性

1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

2．實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項

1．試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

2．實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。

3．不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6．洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

7．底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

8．加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

9．按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法

1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

5、保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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