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酶標(biāo)記物方法注意事項(xiàng)
發(fā)布時(shí)間： 2015-06-11 點(diǎn)擊次數(shù)： 1665次酶標(biāo)記物包括酶標(biāo)記抗原、酶標(biāo)記抗體和酶標(biāo)記SPA等。酶標(biāo)記物質(zhì)量的好壞直接關(guān)
系到免疫酶技術(shù)的成功與否，因此被稱為關(guān)鍵的試劑。酶標(biāo)記物中zui常用的是酶標(biāo)記抗
體，它是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成。酶標(biāo)記抗體的質(zhì)量主要取決于純度好、
活性強(qiáng)及親和力高的酶和抗體，其次要有良好的制備方法。目前，高質(zhì)量的酶(如辣根過氧
化物酶，簡(jiǎn)稱HRP)國(guó)內(nèi)已有商品供應(yīng)。高質(zhì)量的抗體則可通過提取純化而獲得。在制備方
法上，宜選用產(chǎn)率高、不影響結(jié)合物的活性和不混雜干擾性物質(zhì)且操作簡(jiǎn)便易行的方法。注意事項(xiàng)
1. 在具備高質(zhì)量HRP的條件下，所要標(biāo)記的抗體也要活性高,效價(jià)高(zui低1∶16),純度
高，親和力好，這是保證標(biāo)記物效價(jià)高，免疫活性好的首要條件。
2. 所使用試劑的PH和濃度及用量必須嚴(yán)格掌握。所用試劑，(或必需)新鮮配
制。如在戊二醛標(biāo)記法中所用戊二醛應(yīng)為新鮮純品，因戊二醛儲(chǔ)存過久可形成縮和體(雜
質(zhì))。否則，影響標(biāo)記效果。
3. 室溫?cái)嚢钑r(shí)須避光，室內(nèi)溫度一般在25℃為宜。標(biāo)記物每次透析前，須認(rèn)真檢
查，防止漏液。
4. 濃的標(biāo)記物相當(dāng)穩(wěn)定，常加入30～40％甘油于-10℃下保存。4℃可保存1～2年，但
稀釋成1∶10，只能保存數(shù)周。已配制的使用液應(yīng)在12小時(shí)內(nèi)用完。切忌反復(fù)凍融。